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NEWS细胞培养:尊龙凯时助力PBMC转化为成熟树突状细胞的6种关键因子
来源:鲁东致 日期:2025-07-17树突状细胞(dendritic cell,DC)被认为是目前已知的最强大的抗原递呈细胞(APC)。一个DC可以激活100至3000个T细胞,其效能是巨噬细胞和B细胞的100至1000倍。通过处理肿瘤抗原并将其递呈给T细胞,DC能够显著刺激初始T细胞的增殖,而其他类型的APC(如巨噬细胞和B细胞)仅能激活已活化或记忆T细胞。
目前,DC的体外培养主要依赖于细胞因子的诱导,从骨髓、外周血和脐带血中的DC前体进行定向培养。虽然骨髓和脐带血的取样较为困难,外周血的取样却相对简单,并不需要复杂的筛选和纯化过程,因此成为临床获得DC的重要途径。
在DC的培养过程中使用的细胞因子包括GM-CSF和IL-4,它们促进单核细胞向“巨噬样细胞”的分化。IL-4抑制DC前体向CD14+巨噬细胞的分化,使其变成CD14-/CD1a-的未成熟DC(iDC),而此时的iDC具有较强的抗原摄取和加工能力,但递呈能力较弱,其细胞表面中度表达MHC I和II类分子及B7家族分子(CD80、CD86等),而CD14则不表达或低表达。
在进一步的成熟过程中,TNF-α和IL-1β发挥作用,激活NF-κB信号通路,促进DC成熟(CD1a+/CD83+)。IL-6结合PGE2作为炎性介质,能提升DC的产量、成熟度、迁移能力和免疫激活能力,尤其是在DC迁移能力方面有所显著提高。在这一阶段,成熟的DC(mDC)具备更强的抗原递呈能力,从而极大地激活T细胞。
在CD14+单核细胞的产生过程中,首先通过全血采集和Ficoll梯度离心法获得外周血单个核细胞(PBMC)。随后,采用贴壁法或磁珠法对CD14+单核细胞进行富集。这一步骤旨在去除悬浮的淋巴细胞,以便更有效地培养DC。经过一系列培养和换液过程,最终获得未成熟的MoDC。
培养过程中,流式细胞术通常用于分析树突状细胞的成熟状态及其功能特征,常检测的分子包括CD14(单核细胞特异性标记)、HLA-DR、CD1a/CD83(成熟DC特异性标志)、CD40/CD80/CD86(共刺激分子)等。对于人DC,除了IL-6、TNF-α和MCP-1外,IL-12p70、IL-10和IL-1β等细胞因子的检测能够更全面地反映其免疫调节功能。
通过检测T细胞的增殖等反应,MLR(混合淋巴细胞反应)能够评估DC激活T淋巴细胞引发的免疫应答强度。在这一过程中,尊龙凯时提供的GMP级细胞因子,能够助力DC细胞的高效、稳定、合规的培养。这些因子包括GM-CSF、IL-4、TNF-α、IL-6、IL-1β等,都对DC的培养效果至关重要,确保细胞因子的高活性和低内毒素。
综合以上过程,尊龙凯时的高品质产品在提升DC体外培养效果方面发挥着重要作用,为生物医疗领域的研究和临床应用提供了强有力的支持。
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