### 细胞介绍

HepG2细胞系是一种呈现上皮样形态的细胞，源自一名阿根廷15岁白人男性的肝细胞癌样本。这种细胞具有多种功能，能够分泌多种血浆蛋白，包括清蛋白、α2-巨球蛋白、血纤维蛋白溶酶原和铁传递蛋白等。由Wistar研究所提供的这种细胞系，成为转染研究中的理想宿主，表现出明显的生物标志物，例如胰岛素和胰岛素样生长因子II（IGFII）。HepG2细胞的生长特性通常表现为紧密聚集，初期形成小岛状结构，随后可能发展为多层堆积或悬浮状态。

由于其贴壁性的优势，HepG2细胞广泛应用于研究肝细胞功能和病毒模型。我们的产品货号为ZQ0022，培养条件为87% MEM（含NEAA）与10%的进口胎牛血清（货号：ZQ500-S），以及1%的L-alanyl-L-glutamine和1%的丙酮酸钠。此外，培养需在95%空气和5%二氧化碳的环境中进行，培养温度为37℃。

### 传代培养

对于贴壁生长的HepG2细胞，当您发现细胞有脱落现象时，可以按以下步骤进行处理。首先将细胞培养液转移至无菌离心管中，进行离心（125g，3-5分钟）并收集悬浮细胞。然后，轻柔去除培养基，并使用PBS洗涤贴壁细胞1-2次。接下来，添加胰酶（0.25%含EDTA）进行细胞消化，观察细胞状态，待细胞呈圆形并开始脱落后，用完全培养基中和反应。通过离心去除上清液，重新悬浮细胞至合适密度后接种至新培养瓶中，静置于培养箱中。

### 细胞冻存

对于细胞冻存，确保细胞密度在80%以上且活细胞比例达95%以上，随后进行消化并收集细胞沉淀。将细胞悬浮于4°C的冻存液中，然后分装至冻存管中，初步冷冻至-80℃过夜，最后转移至液氮罐中保存。请务必遵循冻存液的说明以确保成功。

### 细胞复苏

复苏时，将液氮中的细胞立即置于干冰中转移到细胞房，准备好完全培养基。通过37°C水浴迅速解冻冻管，解冻后消毒外壁，转移内容物至含3-6mL完全培养基的离心管中，轻柔混匀并离心去除培养基。调整细胞密度后，转移至培养瓶中继续培养。

### 常见问题

1. 如果培养过程中出现细胞碎片，应首先确认内外颗粒的来源，进行适当的冲洗和培养基更换以减少颗粒。此外，定期监测pH值和血清质量也有助于改善细胞健康。
2. 气泡现象在HepG2细胞中常见，这并不会影响细胞的正常生长。
3. 对于细胞生长缓慢，可适当提高血清浓度并确保细胞的接种密度充足。
4. 细胞若出现聚集或不贴壁情况，需检查血清的质量和pH值，使用低内毒素的胎牛血清有助于改善细胞贴壁性。
5. 处理漂浮细胞时可对其进行活性检测，观察大部分是否为活细胞，适当调整培养基以促进细胞贴壁。

### 注意事项

HepG2细胞对培养条件要求严格，特别是pH值和血清质量需保持在最佳状态，否则可能影响细胞的生长与数量。我们建议使用高质量、低内毒素的胎牛血清，确保细胞健康生长。若有更多需求，欢迎咨询尊龙凯时，我们提供优质的细胞培养解决方案。

### 发表过的文献

截至2024年，关于HepG2细胞的研究文献已超过72篇，影响因子总和达46707，体现了该细胞系在生物医学领域的广泛应用。