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尊龙凯时内毒素(ET)蛋白溶液ELISA试剂盒实验流程

来源:马宜生 日期:2025-03-13

尊龙凯时的内毒素(ET)ELISA试剂盒专为科学研究设计,严禁用于医学诊断。该试剂盒采用双抗体一步夹心法,通过酶联免疫吸附试验(ELISA)实现目标分析。

尊龙凯时内毒素(ET)蛋白溶液ELISA试剂盒实验流程

检测原理: 在预先包被adropin(AD)抗体的微孔中,依次加入测试样本、标准品及HRP标记的检测抗体,经过温育后进行彻底洗涤。使用TMB底物进行显色,TMB在过氧化物酶的催化作用下转化为蓝色,再在酸性环境中转变为黄色。显色的深浅与样品中adropin(AD)的浓度成正比。利用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),进一步计算样本的浓度。

样品收集、处理及保存方法:

  1. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,避免任何细胞刺激。血液收集后,3000转离心10分钟,迅速小心分离血清与红细胞。
  2. 血浆:选用EDTA、柠檬酸盐或肝素作为抗凝剂,3000转离心30分钟后取上清。
  3. 细胞上清液:经过3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。
  4. 组织匀浆:将组织放入适量的生理盐水中捣碎,进行3000转离心10分钟,取上清。
  5. 保存:如样品未能及时检测,请按一次使用量分装,置于-20℃冷冻,避免反复冻融,在使用前需在室温下完全解冻,确保样本均匀。

注意事项:请严格遵循试剂盒的使用说明,避免任何可能导致结果偏差的操作。

试剂盒组成: 其中标准品(S0-S5)浓度对应为:0、25、50、100、200、400 pg/mL。

试剂准备:将20×洗涤缓冲液按1:20稀释,即将1份20×洗涤缓冲液与19份蒸馏水混合。

结果判断:在Excel中绘制标准曲线,以标准品浓度为横坐标,相应OD值为纵坐标,生成线性回归曲线,利用曲线方程计算各样本浓度值。

免责声明:本试剂盒仅用于科研目的,不应用于诊断或治疗用途。有关数据的准确性请遵循实验室标准操作程序。

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